연구 목적으로만 사용할 수 있습니다. 진단 절차에는 사용할 수 없습니다.
생리적 체액의 아미노산 분석용 aTRAQ 키트을 사용하면 생리적 시료에서 아미노산 45종을 정량 분석할 수 있습니다. 이 키트은 LC/MS/MS 시스템에서 사용할 수 있도록 설계되었습니다.
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aTRAQ 시약은 간섭이 줄어든 분자량 영역 내 아미노산 시료와 내부 표준물의 MS/MS 조각화를 지원하는 일관성 질량 태그를 제공합니다. 분석된 각 아미노산에 대해 내부 표준물을 사용하면 정량 분석의 정밀도와 정확도가 향상됩니다. 시료와 각 아미노산 표준물의 머무름 시간과 분자량을 비교하므로, 더욱 정확한 확인이 가능해집니다.
aTRAQ 시약 유도체화 방식은 아래 그림과 같습니다(그림 1). 각 aTRAQ 시약 태그는 리포터 엔드(reporter end)와 각 아미노산의 일차 또는 이차 아미노군과 결합된 반응 엔드(reactive end)로 구성됩니다. 시료용으로 사용되는 리포터 태그의 분자량은 121 amu입니다. 내부 표준물용으로 사용되는 리포터 태그의 분자량은 113 amu입니다.
표치 처리 프로토콜은 다양한 생리학적 기질(예: 혈장, 소변, 뇌수척액 및 조직 추출물)과 호환됩니다. 시료(40 µL)는 처음 설포살리실산(sulfosalicylic acid) 용액과 혼합됩니다. 표지 처리 반응은 기본 pH에서 완충됩니다. 30분 동안 aTRAQ 시약 Δ8로 표지 처리된 시료는 건조된 후 사전에 aTRAQ 시약 Δ0으로 표지 처리된 내부 표준물과 혼합됩니다. 동위원소 사이트 수가 다른 점을 제외하고 두 aTRAQ 시약 구조는 동일합니다. 그런 다음 혼합물은 다중 반응 모니터링(MRM) 모드에서 작동 중인 Triple Quadrupole 장비 또는 QTRAP 시스템을 통해 LC/MS/MS로 분석됩니다. 50°C로 가열된 C18 컬럼을 사용하면 HPLC가 분리됩니다. 농도구배, 세정 및 평형화에 총 18분밖에 걸리지 않습니다(그림 2). Scheduled MRM 알고리즘을 사용하면 다수의 MRM 전이물을 모니터링하는 동안 체류 시간이 극대화되므로, 최고의 데이터 품질과 재현성을 얻을 수 있습니다.
이 방식을 사용하면 차별적으로 태그 처리된 아미노산의 머무름 시간이 동일하므로, HPLC에서는 분리 태그를 통해 차별적으로 표지 처리된 동일한 아미노산을 구별할 수 없게 됩니다. MS/MS 모드에서 태그는 조각화되어 여러 가지 질량을 생성하는 동위원소로 인코딩된 리포터 이온을 생성합니다. 표지 처리된 아미노산 질량과 리포터 이온 질량으로 구성된 MRM 전이물은 시료와 내부 표준물의 동일한 아미노산을 구별하는 데 사용됩니다. 이러한 피크 영역 비율은 시료 내 아미노산 농도를 계산하는 데 사용됩니다(그림 3).
키트 |
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부품 번호 | 키트 이름/설명 |
4442669 | aTRAQ Starter Kit Physiological 50 Assay 또한 다음이 포함되어 있습니다. aTRAQ Reagent Kit Physiological 50 Assay (4442668) aTRAQ Unlabeled Standard (4442687) allo-Isoleucine (4374875) Control Plasma (4386703) aTRAQ Internal Standard (4442688)
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4442689 | aTRAQ Starter Kit Physiological 50 Assay Green (no user guides included) |
4374841 | Amino Acid Analyzer C18 Column |
4442672 | aTRAQ Kit Physiological 50 Assay |
4442691 | aTRAQ Kit Physiological 50 Assay Green (사용자 가이드 미포함)) Includes the same components as the aTRAQ Kit Physiological 50 Assay (4442672) but does not include the Quick Reference Card. |
4442673 | aTRAQ Kit Physiological 200 Assay Contains sufficient materials to label 200 physiological samples with aTRAQ™ Reagent, the aTRAQ Internal Standard (4442688) with a Certificate of Analysis, and the Quick Reference Card. |
4442692 | aTRAQ Kit Physiological 200 Assay Green (no user guides included) aTRAQ Kit Physiological 50 Assay(4442672)와 구성 요소는 동일하지만 빠른 참조 카드가 들어 있지 않습니다. |
4442674 | aTRAQ Standards Set Physiological aTRAQ Internal Standard (4442688) aTRAQ Unlabeled Standard (4442687) allo-Isoleucine (4374875) |
4386703 | Control plasma 알려진 농도의 아미노산이 첨가된 혈장 시료입니다. 생리적 기질을 사용하여 aTRAQ 키트과 프로토콜을 테스트하는 데 사용할 수 있습니다. 아미노산 참조 범위가 기록된 데이터 시트가 들어 있습니다. 테스트를 75회까지 수행할 수 있습니다. |
4442688 | aTRAQ Internal Standard aTRAQ 시약 Δ0으로 표지 처리된 아미노산 표준물로, aTRAQ 시약 Δ8로 표지 처리된 각 시료를 첨가하면 내부 표준물로 사용할 수 있습니다. 표준물 내 각 아미노산 농도가 기재된 분석 인증서가 들어 있습니다. 50가지 시료에 충분합니다. |