연구 목적으로만 사용할 수 있습니다. 진단 절차에는 사용할 수 없습니다.
iTRAQ 시약은 최초의 다중화된 아민 특이적인 안정 동위원소 시약 세트로, 중요한 PTM 정보를 유지하면서 상대적 및 절대적으로 동시에 동정 및 정량 분석할 수 있도록 서로 다른 생물학적 시료(최대 8개까지) 내 모든 펩타이드를 표지 처리할 수 있습니다. iTRAQ 시약 킷에는 4플렉스 및 8플렉스 등 두 가지 유형이 있습니다. 더욱 경제적인 벌크 팩으로 iTRAQ 시약 - 8플렉스도 제공됩니다.
- 다중 시료에서 단백질을 동시에 동정 및 정량화
- PTM(post-translational modification)을 포함하여 모든 펩타이드를 표지 처리하여 단백질 및 단백질체 대상 범위 확장
- 단백질 한 개마다 펩타이드 여러 개를 태그 처리하여 MS/MS 스펙트럼에서 자신 있게 동정 및 정량 분석 수행
- 처리량이 증가하여 자신 있게 단백질 바이오마커 발굴 연구 수행
- 복잡성이 줄어든 시료를 분리할 필요가 없는 간단한 워크플로우 제공(예: 친화성 풀다운(affinity pull-down)).
- 한 번의 실험에서 서로 다른 생물학적 시료를 최대 8개까지 분석하도록 다중화에 대한 유연성 제공
- 모든 SCIEX 단백질체학 LC/MS/MS 플랫폼에서 ProteinPilot™ 소프트웨어로 완벽하게 지원
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펩타이드 태그 처리 케미스트리의 혁신
iTRAQ® 시약은 동위원소 펩타이드 태그 처리 기술로, 펩타이드 클래스에 관계없이 모든 일차 아민을 표지 처리할 수 있습니다. PTM(post-translational modification)과 같은 중요 정보가 보존되므로, 이 태깅 시스템을 사용하면 시료에서 더욱 상세한 정보를 확인할 수 있습니다.
Figure 1: iTRAQ® Reagent - 8plex protein quantitation.
고처리량 단백질 바이오마커 발굴
고처리량 바이오마커 발굴의 경우 시료(최대 8개까지)에서 동시에 단백질을 동정 및 정량 분석할 수 있습니다. 간소화된 iTRAQ® 시약 워크플로우는 비표지 처리 분석법에 비해 크로마토그래피 요구 사항이 엄격하지 않고 신뢰도가 높은 결과를 제공합니다. 그리고 표지 처리할 필요가 없는 프로파일링 분석법과 달리 iTRAQ® 시약은 분리 전략과 완벽하게 호환되므로, 저농도 단백질을 "보다 심도 있게" 평가할 수 있습니다.
실험 유연성과 신뢰할 수 있는 동정
실험 설계 유연성이 더욱 강화되어 서로 다른 시료를 최대 8개까지 동시에 분석할 수 있습니다. 다중화로 수많은 시료 상태를 비교하고 유연성을 통해 실험을 이중 및 삼중으로 실행할 수 있습니다. 신호가 증가하여 iTRAQ® 시약 - 8플렉스로 표지 처리한 펩타이드의 MS/MS 조각 결과가 더욱 명확해지고 펩타이드 동정 결과의 신뢰도가 더욱 높아집니다. 단백질 한 개마다 펩타이드 여러 개를 태그 처리 및 분석하여 단백질 동정을 더욱 강화합니다.
Figure 2: iTRAQ® Reagents - 8plex protein identification.
정량 생물학 솔루션
상대적 또는 절대적 정량 분석 수행 여부와 관계없이 iTRAQ® 시약 - 8플렉스, MS 장비 및 애플리케이션 소프트웨어는 간편한 통합 솔루션과 유연성을 제공하면서 정량 생물학에 필요한 단백질 정량 분석 및 동정에 자신감을 더해 줍니다. 이러한 시약은 풀다운(pull-down), 막단백질 연구, 바이오마커 결정의 발굴과 밸리데이션 분석, 관심 있는 표적 단백질의 절대 정량 분석을 포함한 수많은 응용 분야에 적합합니다. 시약은 대부분의 질량 분석기와 호환되지만 SCIEX 장비에 최적화되어 있습니다.
Kits |
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Part Number | Kit Name/Description |
| 4352135 | iTRAQ Reagents Multiplex Kit iTRAQ 시약 114, 115, 116, 117(4플렉스) 및 2플렉스 분석법 10회, 3플렉스 분석법 6회 또는 4플렉스 분석법 5회를 수행할 수 있는 버퍼와 시약이 들어 있습니다. 10팩 트립신은 별매품입니다. 시약 튜브 1개마다 단백질 소화물을 최대 100 ug까지 표지 처리할 수 있습니다. (참고: 혈장 및 혈청에 단백질 소화물 50 ug을 사용하는 것이 좋습니다.) |
| 4352157 | Trypsin, TPCK treated, 10-팩 리신 및 아르기닌 잔류물의 카르복실(carboxyl) 측에서 특이적으로 펩타이드 결합체를 가수분해하는 변형된(TPCK 처리된) 세린 단백분해효소(serine protease)입니다. 소화의 일관성이 향상되도록 염화칼슘이 들어 있습니다. 변형된 트립신은 N-토실-L-페닐알라닌 클로로메틸 케톤(N-tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone, TPCK)으로 처리되어 관련 없는 키모트립신 분해 활동을 비활성합니다. 각 패키지에는 바이얼마다 25 µg이 들어 있는 바이얼 10병이 있어 시료 100 ug을 사용할 때 2플렉스 분석법 12회, 3플렉스 분석법 8회 또는 4플렉스 분석법 6회를 수행할 수 있습니다. 혈청/혈장 실험의 경우 시료 한 개마다 단백질 50 ug을 표지 처리하는 것이 좋습니다. 따라서 트립신이 절반만 필요합니다. |
| 4352160 | iTRAQ Reagents Methods Development Kit 분리 분석을 최대 3회까지 수행할 수 있도록 우수한 효소 소화와 펩타이드 표지 처리 프로토콜을 개발하는 데 필요한 iTRAQ 시약 114, 117, 테스트 시료, 버퍼 및 시약이 들어 있습니다. 개별 시약마다 단백질 소화물을 최대 100 ug까지 표지 처리할 수 있습니다. 다음이 들어 있습니다. 스타터 킷 - 하드웨어, 양이온 교환 버퍼 팩 및 양이온 교환 카트리지, 프로토콜, iTRAQ 시약 킷. 오프라인 시료 전처리의 경우 이와 함께 4326688, 4326690 및 4326689도 주문하십시오. SCIEX에서는 주사기 또는 튜브를 제공하지 않습니다. |
| 4369561 | iTRAQ Reagents 3-Assay Duplex Trial Kit iTRAQ 시약 114 및 117과 우수한 프로토콜을 개발하고 시료 전처리 프로토콜이 표지 처리와 소화를 간섭하지 않는지 확인할 수 있는 충분한 양의 자재가 들어 있습니다. 킷에는 시약, 반응 용액 및 검사 혼합물이 들어 있습니다. 카트리지(부품 번호: 4326695) 및 양이온 교환 버퍼(부품 번호: 4326747)를 별도로 구매해야 합니다. |
| 4370280 | iTRAQ Reagents Application Kit-Plasma 시료당 단백질 50 ug을 기준으로 2플렉스 실험 8회 또는 4플렉스 실험 4회를 수행할 수 있는 충분한 양의 반응 용액과 iTRAQ 시약 114, 115, 116 및 117이 들어 있습니다. |
| 4370285 | Trypsin, TPCK treated, 8-팩 리신 및 아르기닌 잔류물의 카르복실(carboxyl) 측에서 특이적으로 펩타이드 결합체를 가수분해하는 변형된(TPCK 처리된) 세린 단백분해효소(serine protease)입니다. 변형된 트립신은 N-토실-L-페닐알라닌 클로로메틸 케톤(N-tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone, TPCK)으로 처리되어 관련 없는 키모트립신 분해 활동을 비활성합니다. 각 패키지에는 바이얼마다 25 µg이 들어 있는 바이얼 8병이 있어 시료 100 ug을 사용할 때 2플렉스 분석법 10회, 3플렉스 분석법 6회 또는 4플렉스 분석법 5회를 수행할 수 있습니다. 혈청/혈장 실험의 경우 시료 한 개마다 단백질 50 ug을 표지 처리하는 것이 좋습니다. 따라서 트립신이 절반만 필요합니다. 참고: 염화칼슘을 포함하지 마십시오. |
| 4374321 | iTRAQ 시약 애플리케이션 킷-단백질 시료당 단백질 25 ug을 기준으로 2플렉스 실험 10회 3플렉스 실험 6회 또는 4플렉스 실험 5회를 표지 처리할 수 있는 충분한 양의 반응 용액, 검사 혼합물, iTRAQ 시약 114, 115, 116 및 117(단백질 25 ug용)이 들어 있습니다. |
| 4381664 | iTRAQ Reagent- Multiplex Buffer Kit SDS - 변성, TCEP 환원 시약, MMTS 시스테인 차단 시약, TEAB 버퍼 및 이소프로판올(Isopropanol)이 들어 있습니다. 다중화 킷 2개에 충분한 양입니다. |
| 4390811 | iTRAQ Reagent-8Plex One Assay Kit iTRAQ 시약 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119 및 121과 우수한 프로토콜을 개발하고 시료 전처리 절차가 표지 처리와 소화를 간섭하지 않는지 확인할 수 있는 충분한 양의 자재가 들어 있습니다. 또한 SDS - 변성, TCEP 환원 시약, MMTS 시스테인 차단 시약, TEAB 버퍼 및 이소프로판올(Isopropanol)이 들어 있습니다. |
| 4390812 | iTRAQ Reagent-8Plex Multiplex Kit iTRAQ 시약 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119 및 121과 8플렉스 분석법을 5회 수행할 수 있는 충분한 양의 자재가 들어 있습니다. 시약 튜브 1개마다 단백질 소화물을 최대 100 ug까지 표지 처리할 수 있습니다. (참고: 혈장 및 혈청에 단백질 소화물 50 ug을 사용하는 것이 좋습니다.) 다중화 버퍼 킷(부품 번호 4381664)은 별매품입니다. |
| 4393528 | iTRAQ Reagent - 8Plex 25 U bulk pack 튜브마다 8플렉스 시약이 25개씩 있는 튜브 8개가 들어 있습니다. |
| 4393529 | iTRAQ Reagent - 8Plex 50 U bulk pack 튜브마다 8플렉스 시약이 50개씩 있는 튜브 8개가 들어 있습니다. |
| 4466096 | iTRAQ Reagent - Multiplex 25 U bulk pack 튜브마다 4플렉스 시약이 25개씩 있는 튜브 4개가 들어 있습니다. |
| 4326688 | 카트리지 홀더(별매품) 양이온 교환 카트리지와 아비딘(avidin) 친화성 카트리지를 작동하기 위한 카트리지 홀더입니다. |
| 4326690 | 출구 커넥터 수동으로 양이온을 교환하는 데 사용되는 출구 튜브입니다. |
| 4326689 | 니들포트 어댑터(별매품) 수동으로 양이온을 교환하는 데 사용됩니다. |
| 4326695 | 양이온 교환(5팩) 0.2 ml 양이온 교환 카트리지 5개가 있는 패키지입니다. 카트리지는 카트리지 홀더(별매품)와 함께 작동합니다. |
벌크에서 iTRAQ가 제공됩니까?
예. 벌크 시약은 iTRAQ 시약 25개 킷 및 50개 킷에서만 제공됩니다. 대략 10개당 버퍼 킷 1개가 필요합니다.
4플렉스 iTRAQ와 8플렉스 iTRAQ 간의 배양 시간에 큰 차이가 있는 이유는 무엇입니까?
iTRAQ 8플렉스는 4플렉스와 다른 분자이므로, 반응 시간이 더 깁니다(120분/60분).
4플렉스의 114~117과 8플렉스의 114~117이 동일합니까?
아니요. 4플렉스와 8플렉스는 서로 다른 시약이며 동위원소 실험에 혼합해서는 안 됩니다.
iTRAQ 사용 후 표적 펩타이드의 전하 상태 분포가 다른 이유는 무엇입니까?최종 pH가 다르므로 2+ 및 3+ 전하 상태 간에 차이가 나타날 수 있습니다. 일반적으로 더 많은 2+ 이온으로 이동하면 아세트산 암모늄 5 mM을 사용하여 pH를 4.0으로 조정할 수 있습니다.
바이얼을 개봉한 후 iTRAQ 시약을 다시 사용할 수 있습니까?
아니요. iTRAQ 시약의 각 바이얼은 충진되어 불활성 가스로 밀봉되어 있습니다. 시약이 수분에 노출되면 성능이 쉽게 저하되어 이후 표지 처리 효율이 나빠집니다. 벌크 시약 킷의 경우 분취 및 보관을 위한 특별 프로토콜이 있습니다.
iTRAQ 용액 색상이 다르게 보입니다. 괜찮습니까?
문제 없습니다. iTRAQ 시약 색상은 미량의 금속부터 수분까지 다양한 요인에 따라 약간씩 변할 수 있습니다. 일반적으로 시약 성능은 이에 영향을 받지 않습니다.
표지 처리할 수 있는 단백질 양은 얼마입니까?
8플렉스 시약의 바이얼마다 iTRAQ 시약 2 µmol이 들어 있습니다. 이는 일반적으로 단백질 소화물 20~100 µg을 표지 처리할 수 있는 양입니다. 펩타이드가 아닌 일차 아민 화합물이 다양하게 있는 혈장 및 혈청 시료의 경우 프로토콜을 조정해야 할 수도 있습니다. 중요한 요인으로는 버퍼링(pH 7.5~8.5), 버퍼 농도(90~100 mM), iTRAQ 시약 농도(40 mM에서 ±5%) 및 총 유기 농도(65% 이상)가 있습니다.
표지 처리 후 얼마 동안 시료를 보관할 수 있습니까?
시료를 즉시 분석하려는 경우에만 표지 처리하는 것이 좋습니다. 표지 처리된 시료를 2주 이상 보관하지 마십시오.
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